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SYPRO Red
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SYPRO Red ist ein Fluoreszenzfarbstoff vom Merocyanin-Typ,cite-ref-demchenko-1-1[1] der zur FΓ€rbung von Proteinen im Zuge einer Proteincharakterisierung verwendet wird,cite-ref-ep0774122-2-1[2] meistens in einer SDS-PAGE.cite-ref-3[3]cite-ref-4[4]

Contents


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Eigenschaften

SYPRO Red bindet wie auch sein Analogon SYPRO Orange selektiv an Proteine ΓΌber 6,5 Kilodalton (auch Glykoproteine) in SDS-Micellen,cite-ref-demchenko-1-2[1] nicht jedoch an DNA oder Lipopolysaccharide.cite-ref-sigma-5-0[5]cite-ref-6[6] Die MutagenitΓ€t, ReproduktionstoxizitΓ€t und KarzinogenitΓ€t von SYPRO Red ist unbekannt.cite-ref-sigma-5-1[5] Die Absorptionsmaxima liegen bei Ξ» = 300 nm und 550 nm, die Emission ist bei Ξ» = 630 nm maximal.cite-ref-sigma-5-2[5] Die SensitivitΓ€t bei SDS-PA-Gelen liegt mit SYPRO Red bei etwa 4–8 ng Protein,cite-ref-sigma-5-3[5]cite-ref-molecular-probes-7-0[7] also etwas schlechter als bei der SilberfΓ€rbung. Aufgrund der Fluoreszenz besitzt die SYPRO Red-FΓ€rbung bei einer MengenabschΓ€tzung im Vergleich zur SilberfΓ€rbung oder Coomassie einen grâßeren linearen dynamischen Bereich, d. h. eine bessere Korrelation zwischen der Proteinmenge und der SignalintensitΓ€t.cite-ref-sigma-5-4[5] SYPRO Red eignet sich nicht zur FΓ€rbung von Proteinen auf Western Blots, 2D-Gelen oder IEF-Gelen.cite-ref-sigma-5-5[5] Im Gegensatz zur Silber- und Coomassie-FΓ€rbung werden zur Fixierung vor einer FΓ€rbung zwar EssigsΓ€ure verwendet, jedoch keine Alkohole wie Methanol oder Ethanol, da SYPRO Red zur FΓ€rbung auf die Anwesenheit von SDS angewiesen ist.cite-ref-molecular-probes-7-1[7]

Einzelnachweise

cite-note-demchenko-11. Aleksandr Petrovich Demchenko: Advanced Fluorescence Reporters in Chemistry and Biology III: Applications in Sensing and Imaging Band 3 von Advanced Fluorescence Reporters in Chemistry and Biology. Springer 2011. ISBN 9783642180354. S. 179ff.
cite-note-ep0774122-22. Patent EP0774122B1: Protein-FΓ€rbung mittels Merocyanin Farbstoffe. Angemeldet am 20. Mai 1996, verΓΆffentlicht am 19. August 2009, Anmelder: Molecular Probes Inc, Erfinder: Richard P. Haugland et al.β€Œ
cite-note-33. ↑ T. H. Steinberg, L. J. Jones, R. P. Haugland, V. L. Singer: SYPRO orange and SYPRO red protein gel stains: one-step fluorescent staining of denaturing gels for detection of nanogram levels of protein. In: Analytical biochemistry. Band 239, Nummer 2, August 1996, S. 223–237, ISSN 0003-2697. doi:10.1006/abio.1996.0319. PMID 8811914.
cite-note-44. ↑ S. Gallagher, D. Chakavarti: Staining proteins in gels. In: Journal of visualized experiments : JoVE. Nummer 17, 2008, ISSN 1940-087X. doi:10.3791/760. PMID 19066521. PMC 3253607 (freier Volltext).
cite-note-sigma-55. ↑ Datenblatt SYPRO Red Protein Gel Stain bei Sigma-Aldrich, abgerufen am 28. November 2013 (PDF).
cite-note-66. ↑ T. H. Steinberg, R. P. Haugland, V. L. Singer: Applications of SYPRO orange and SYPRO red protein gel stains. In: Analytical biochemistry. Band 239, Nummer 2, August 1996, S. 238–245, ISSN 0003-2697. doi:10.1006/abio.1996.0320. PMID 8811917.
cite-note-molecular-probes-77. ↑ Molecular Probes / Life Technologies: SYPRO Orange and SYPRO Red Protein Gel Stains. 2003. PDF.